天化殪癌细胞更新剂的小鼠抑瘤实验报告

 

实验材料
1、药物:浅黄色粉末,由山西省临汾.艺敬中西医结合治癌研究所提供,用蒸溜水配成混悬液备用。
2、动物:昆明种小鼠,雄性,体重18-22g,由天津市动物中心提供。
T纯系小鼠,雌性,体重18-22g,由天津医药科学研究医学动物实验室提供。C57BL小鼠雌雄兼用体重18-22g。由北京医科大学动物实验到提供。
615小鼠,雌性,体重18-22g,由中国医学科学院血液病研究所医学动物实验室提供。
3、瘤株:U14宫颈癌、S180肉瘤、L795肺腺癌LEWIS肺癌,均为实验型小鼠瘤株。肝癌产体型(HEPS)则由肝癌腹水型(HEPA)接种于腋下而成。艾氏癌腹水型(EAC)和L615白血病。

实验方法:
(一)实体瘤:先用肿瘤生长旺盛且无溃破,健康状况良好的荷瘤动物,脱 臼处死,固定于手术板上,用碘酒、酒精消毒动物皮肤,无菌条件下在接种罩内剥离肿 瘤(所用器械均高压灭菌),按1:3加入无菌生理盐水,用组织匀浆器制成细胞悬液,但L795肺腺癌需按1:10制成细胞悬液,于腋窝皮下接种 0.2ML(接种部位皮肤先后用碘酒、酒精消毒)。
(二)腹水瘤:无菌条件下,取接种6-8天EAC腹水,用生理盐水按1:4稀释后,给每鼠腹腔接种0.2ML。
(三)白血病:无菌条件下,取接种5-6天的L615小鼠的脾脏200Mg加8ML生理盐水,用组织匀浆器制成悬液,给每鼠皮下接种0.2ML。动物接种 种瘤后24小时,进行分组,一般分为5组即对照组,阳性药对照组和3个实验组。对照组每天灌胃蒸溜水0.4ML,阳性一对照药组,每天IP环磷酰胺 (CY)20Mg/Kg,实验组的3个组分别每天灌胃天化殪1g/Kg。0.7g/Kg及0.5g/Kg,各组均给药7天,但L615的试验中则均给药5 天,实体瘤试验均于末次给药后24小时处死动物,剥离瘤块称重,体重按下列公式评定疗效。
肿瘤抑制率=
式中T为给药组平均瘤重:C为对照组平均瘤重。对于腹水瘤及白血病的实验,分组及给药方法均与实体瘤相同,唯在接种手,观察和记录动物死亡时间,计算生存天数,用下列公式计算生命延长率。
生命延长率=
式中C为对照组平均自下而上天数;T为给药组平均生存天灵敏。
以上各种瘤株的抑瘤实验,除EAC仅作一次外,其余的均重复实验3次,抑瘤率超过30%均统计处理。
实验结果
经多次重复测定,证明天化殪癌细胞更新丸对实体瘤,肉瘤180(S180)、宫颈癌U14(U14)、L795肺腺癌、LEWIS肿癌、肿癌实体型 (HEPS)和L615白血病均有良好的抑瘤作用,但对艾氏癌腹水型(EAC)则无效。具体结果见表1–表6

表1:天化殪对S180的作用

组别

动物数(只)

体重(G)

瘤重(G)

抑瘤率

P值

始末

始末

X±SD

(%)

对照

10   10

20.9  24.1

1.99±0.34

CY  20MG/MG

10   10

20.8  20.0

0.77±0.21

61.3

<0.01

治疗组

1G/KG

10    9

20.8  19.6

0.71±0.19

64.3

<0.01

0.7G/KG

10    10

20.9  20.9

0.92±0.21

53.8

<0.01

0.5G/KG

10    10

20.9  22.2

1.03±0.21

48.2

<0.01

对照

10    10

19.9  22.8

2.62±0.38

CY  20MG/MG

10    10

19.9  20.3

1.23±0.22

53.1

<0.01

治疗组

1G/KG

10    10

19.9  20.3

0.80±0.36

68.7

<0.01

0.7G/KG

10    10

19.9  21.0

1.36±0.54

48.1

<0.01

0.5G/KG

10    10

19.8  21.0

1.71±0.56

34.7

<0.01

对照

10    10

19.1  23.7

2.30±0.51

CY  20MG/MG

10    10

19.1  20.2

0.87±0.30

62.2

<0.01

治疗组

1G/KG

10    10

19.6  19.5

0.72±0.18

68.7

<0.01

0.7G/KG

10    10

19.7  20.2

1.11±0.26

51.7

<0.01

0.5G/KG

10    10

19.7  22.8

1.53±0.34

33.5

<0.01

 

表2:天化殪对U14的作用

组别

动物数(只)

体重(G)

瘤重(G)

抑瘤率

P值

始末

始末

X±SD

(%)

对照

10    9

19.3  20.2

1.08±0.24

CY 20MG/MG

10    9

19.5  18.6

0.67±0.32

38.0

<0.01

治疗组

1G/KG

10   10

19.5  18.4

0.49±0.37

52.6

<0.01

0.7G/KG

10   10

19.3  19.2

0.61±0.24

43.5

<0.01

0.5G/KG

10   10

19.3  19.0

0.95±0.32

12.0

<0.01

对照

10   10

21.1  25.2

1.69±0.32

CY  20MG/MG

10   10

20.9  21.7

0.81±0.33

52.1

<0.01

治疗组

1G/KG

10   10

21.0  23.5

0.53±0.15

68.6

<0.01

0.7G/KG

10   10

21.0  24.4

0.98±0.42

42.1

<0.01

0.5G/KG

10   10

21.1  24.6

1.03±0.36

23.1

<0.01

对照

10   10

19.6  20.6

2.25±0.68

CY  20MG/MG

10   10

19.1  18.9

0.94±0.67

58.2

<0.01

治疗组

1G/KG

10   9

19.5  19.2

1.00±0.60

55.6

<0.01

0.7G/KG

10   10

19.1  19.3

1.14±0.80

49.3

<0.01

0.5G/KG

10   10

19.1  19.5

1.41±0.60

37.3

<0.01

 

表3:天化殪对LEWIS肺癌的作用

组别

动物数(只)

体重(G)

瘤重(G)

抑瘤率

P值

始末

始末

X±SD

(%)

对照

10  10

19.8  23.3

1.70±0.41

CY  20MG/MG

10  9

20.2  20.1

0.99±0.36

41.8

<0.01

治疗组

1G/KG

10  9

19.8  18.0

0.42±0.24

75.3

<0.01

0.5G/KG

10  10

19.8  20.3

1.19±0.26

30.0

<0.01

对照

10  10

19.8  23.9

1.72±0.37

CY  20MG/MG

10  9

19.5  19.1

0.98±0.38

43.0

<0.01

治疗组

1G/KG

10  9

19.6  17.8

0.53±0.20

69.2

<0.01

0.7G/KG

10  10

19.7  20.2

1.09±0.24

36.6

<0.01

0.5G/KG

10  10

19.4  20.5

1.22±0.33

29.1

<0.01

对照

10  10

19.8  25.5

2.07±0.52

CY  20MG/MG

10  10

19.8  24.0

1.02±0.47

50.7

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.5  22.6

0.77±0.39

62.8

<0.01

0.7G/KG

10  10

20.3  22.8

0.87±0.34

58.0

<0.01

0.5G/KG

10  10

19.9  22.2

1.47±0.25

29.0

注:第2批实验均用雄性小鼠

 

表4:天化殪对LIPES的作用

组别

动物数(只)

体重(G)

瘤重(G)

抑瘤率

P值

始末

始末

X±SD

(%)

对照

10  10

20.6  24.5

1.84±0.34

CY  20MG/MG

10  10

20.2  19.5

0.82±0.30

55.5

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.0  21.5

0.80±0.15

56.5

<0.01

0.5G/KG

10  10

20.0  22.1

1.16±0.26

37.0

<0.01

对照

10  10

20.8  22.5

1.79±0.37

CY  20MG/MG

10  10

20.6  20.3

0.91±0.30

49.2

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.9  20.2

0.75±0.10

58.1

<0.01

0.7G/KG

10  10

20.6  20.0

1.11±0.30

38.0

<0.01

0.5G/KG

10  10

20.6  22.3

1.38±0.37

22.9

<0.01

对照

10  10

20.2  22.6

1.91±0.48

CY  20MG/MG

10  10

18.7  19.8

0.85±0.11

55.5

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.8  21.0

0.76±0.24

60.2

<0.01

0.7G/KG

10  10

20.8  21.0

1.20±0.27

37.2

<0.01

0.5G/KG

10  10

20.9  21.7

1.51±0.29

19.4

 

表5:天化殪对L795肺腺癌的作用

组别

动物数(只)

体重(G)

瘤重(G)

抑瘤率

P值

始末

始末

X±SD

(%)

对照

10  10

20.6  24.5

1.84±0.34

CY  20MG/MG

10  10

20.2  19.5

0.82±0.30

55.5

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.0  21.5

0.80±0.15

56.5

<0.01

0.5G/KG

10  10

20.0  22.1

1.16±0.26

37.0

<0.01

对照

10  10

20.8  22.5

1.79±0.37

CY  20MG/MG

10  10

20.6  20.3

0.91±0.30

49.2

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.9  20.2

0.75±0.10

58.1

<0.01

0.7G/KG

10  10

20.6  20.0

1.11±0.30

38.0

<0.01

0.5G/KG

10  10

20.6  22.3

1.38±0.37

22.9

<0.01

对照

10  10

20.2  22.6

1.91±0.48

CY  20MG/MG

10  10

18.7  19.8

0.85±0.11

55.5

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

20.8  21.0

0.76±0.24

60.2

<0.01

0.7G/KG

10  10

20.8  21.0

1.20±0.27

37.2

<0.01

0.5G/KG

10  10

20.9  21.7

1.51±0.29

19.4

 

表6:天化殪对L615白血病的作用

组别

动物数(只)

平均存活天数

抑瘤率

P值

始末

X±SD

(%)

对照

10  10

6.4±0.51

CY  20MG/MG

10  10

17.0±4.6

165.6

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

26.8±6.3

318.8

<0.01

0.7G/KG

10  10

18.9±6.1

195.3

<0.01

0.5G/KG

10  10

10.1±2.5

57.8

<0.01

对照

10  10

7.0±0.0

CY  20MG/MG

10  10

16.3±5.3

132.8

<0.01

治疗组

1G/KG

10  10

25.3±5.2

261.4

<0.01

0.7G/KG

10  10

13.6±7.4

94.3

<0.01

0.5G/KG

10  10

8.1±0.6

15.7

对照

10  8

5.8±0.42

CY  20MG/MG

10 10

11.0±2.7

89.7

<0.01

治疗组

0.7G/KG

10  10

8.6±1.1

48.3

<0.01

0.5G/KG

10  10

7.0±2.1

20.7

 

在作对EAC的实验中,对照组平均生存天数为14.1±2.1天,而天化殪1g/Kg(灌胃7天)组平均生存天数为13.9±0.3天,显示对EAC无抗癌活性。
实验小结:通过天化殪癌细胞更新丸对5种小鼠移植性实体瘤的实验表明,天化殪对U14、IIPES、S180、LEWIS肺癌和L795肺腺癌均有良好的 抑瘤作用。在剂量0.5-1.0g/Kg之间基疗效与剂量呈依赖关系,剂量超过2g/Kg则会引起动物死亡数.